Diabetologia：激活但功能破损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次显现出来家兔自身免疫反应到显现出来1改型乳癌病理病症的成果所部在幼儿初期就有很好的描述，多个家兔自身免疫反应阴性的幼儿先前有70%在免疫反应转换后10年底患上乳癌，而随访15年的幼儿这一%增高到84%。相比较之下，%病理1改型乳癌一半以上的改型1改型乳癌的胃癌系统还不会得到更进一步的研究工作。

越来越多的人开始用于仍须系统来度量1改型乳癌的成果：群棒状在显现出来多种家兔自身免疫反应时进入第1先决条件，显现出来血糖异常时进入第2先决条件，显现出来病症时进入第3先决条件。一些多发家兔自身免疫反应阴性的群棒状，在1期和2期，成果较太快，并持续发展为胃癌的1改型乳癌。我们先前描述了一两组在首次检查到多种家兔自身免疫反应抽样后至少10年无乳癌的正因如此太快成果者，这两组病患者人数少，但形态颇为明确。随后，我们发现家兔自身复合物特异性CD8+T肝细胞自由基在成果较太快的病患者先前理论上不实际上，但在近期胃癌和近十年实际上的乳癌病患者先前很更容易检查到。这有可能表明，与成果病患者相比较，这些病患者自身免疫自由基的调节提升。

早期研究工作表明，尽管调节性T肝细胞(Treg)使用量正常，但乳癌病患者实际上一些功用缺点，其先前包括对IL-2的自由基意志力减缓。此外，乳癌病患者先前的畸变CD4+T肝细胞有可能对调节更具抵抗性，表现为畸变T肝细胞的正向消退，自然消除的Treg和棒状外消除的正向Treg，以及复合物境遇的CD4+T肝细胞先前IL-2自由基消退。本研究工作的目的是描述了CD4+调节性T肝细胞(Treg)在大群正因如此较太快成果者先前的形态，他们的平均平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

法则：BOX研究工作是一项以人群为基础的横向研究工作，在21岁以下确诊的病患者亲友先前检查1改型乳癌的险恶因素。我们先前描述了近十年较太快成果者的形态，他们持续保持多重家兔自身免疫反应阴性有约10年，但不会显现出来乳癌的病理病症，太快性或非展开性自身免疫。随后，10名继续持续保持无乳癌并愿意提供者大量血液循环抽样的较太快成果者扩展到T和B肝细胞功用分析法则。在目前的研究工作先前，8名太快成果者(SP两组)，先前位平均年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁间的家兔自身免疫反应阴性。所有的与会者都属于1改型乳癌成果的1期，尽管一些人随后失掉了家兔自身免疫反应对某些复合物的阴性自由基，然而，一名病患者不太有可能属于2期至少6年，但不会显现出来病理病症，一名病患者被诊断为乳癌，该测试者72岁，在采集实验抽样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据分析法则先前对该酪氨酸展开了单独评核子。受控外周血单个核子肝细胞(PBMCs)，采用多参数流式肝细胞拳法和T肝细胞正向试验车评核子酪氨酸先前Treg的Hz、表改型和功用。用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、连续性和回归)展开无监督聚类分析法则，评核子Treg表改型。

结果：与身棒状健康酪氨酸相比较，来自太快成果棒状的知觉CD4+T肝细胞的监督聚类推测，激活的知觉CD4+ TregHz增高，与糖皮质激素正向的TNFR相关酶(GITR)传达增高有关。一名HbA1c升高的病患者与成果较太快者和匹配的对照两组相比较，Treg谱有所不同。功用分析法则表明，与身棒状健康酪氨酸相比较，来自较太快成果棒状的Treg介导的CD4+畸变T肝细胞正向突出损毁。表现为对畸变CD4+T肝细胞CD25和CD134传达的正向增高。

示意图1 了解的表改型分析法则推测，CD4+Treg亚改型在太快成果描述符先前增高。由FlowSOM填充的Treg一楼，聚集在来自所有酪氨酸的活CD4+CD45RA -肝细胞上。根据标示出物传达鉴定出10个元簇:知觉T肝细胞_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;知觉T cell_4;CD49b知觉T肝细胞;HLA-DR + GITR +知觉T肝细胞;CPUTreg_1;CPUTreg_2;CPUTreg_3;和CPUTreg_4。(a)用于9个不同Treg标示出填充的10个元簇的MST。每个节点代表一个战略性(100个战略性)，较大的元战略性(10个元战略性)在节点两组周围上色。每个节点先前的饼示意图回应单个标示出的传达高级别。(b)每个元聚类的热示意图，以推测整棒状标示出传达。(c, d)为HD两组(c)和SP两组(d)填充示意图，以及FlowSOM鉴别的每个元簇的较厚。(e-l)相较丰度为每个metacluster装有新3](丰度> 0.05%)确定为HD和SP两组:CPUTreg_2 (e),CPUTreg_3 (f),CPUTreg_4 (g), HLA-DR + GITR +知觉T肝细胞(h)、知觉T cell_1(i),知觉T cell_2 (j),知觉T cell_3 (k) n d CD49b知觉T肝细胞(l)。浅蓝色圆圈代表**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon选取符号秩检查。此键适用于示意图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

示意图2 用于CITRUS的预测模改型猜测，TregHz的增高是成果较太快的标志。分级介导(a - f)和玉米分析法则(g-k)比较SP与会者和匹配的HD与会者在CD4+CD45RA−T肝细胞上的差异性。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群棒状的近现代示意图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3钼，然后通过HLA-DR和GITR传达展开受控，精心设计FlowSOM群棒状。(b) HD(环纹)和SP(蓝点)两组以及酪氨酸SP 606(浅蓝色)先前CD25+ cd127的Hz概述示意图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+介导子集的装有新3];(c) HLA-DRloGITR−(CPUTreg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(CPUTreg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(CPUTreg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+CPUT cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3传达强度上色，箭头突出的簇被鉴别为SP和HD描述符间的不同。(j)装有新3]推测了在SP(蓝点)和HD(灰点)两组先前，CITRUS知觉Treg_3和Treg_4的相较丰度(%)。(k)平方和推测每个簇的表改型(粉红色)和Treg标示出相较传达与背景传达(红色);上列，CPUTreg_3;示例几天后，CPUTreg_4。背景与所有其他簇先前标示出的传达有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon选取符号秩检查

示意图3 与身棒状健康献血者相比较，成果较太快者知觉treg的GITR增高。每个知觉CD4+T肝细胞元簇(知觉T肝细胞_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;CD49b +知觉T肝细胞;HLA-DR + GITR +知觉T肝细胞;CPUTreg_2;CPUTreg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检查每个传达标示出的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)描述符的传达热示意图(sp606不包括在内)。(c,d)知觉Treg_4元簇先前所有HD(灰色)、所有SP(红色)和SP 606(浅蓝色)的FlowSOM GITR传达串联，推测平方和(c)和概述示意图(d)。Wilcoxon选取符号秩和检查，p< 0.07(浅蓝色)所有酪氨酸包括，p< 0.05(红色)酪氨酸SP 606和匹配的HD不包括在测试先前。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs先前GITR传达，从分级介导，从所有HD(灰色)、所有SP(红色)和SP 606(浅蓝色)串联，推测平方和(e)和概述示意图(f) *p< 0.05, Wilcoxon选取符号秩检查

示意图4 来自较太快成果的CD4+ treg肝细胞控制畸变CD4+T肝细胞的意志力减缓。SP两组用红色的新线和圆圈回应，HD两组用粉红色的新线和圆圈回应，浅蓝色的新线/圆圈回应酪氨酸sp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T肝细胞展开分选。CD4+CD25−(；也者)被标示出为CFSE, Treg按判读的%指示剂。用抗CD3 /28微珠激活肝细胞，培训3天后展开流式肝细胞拳法检查。(a-d)与CD4+；也者相较应的treg培训(自棒状)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD；也者培训。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE正向总和(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的正向总和。用于阴性对照(激活的响应肝细胞不含treg)计算正向总和。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析法则。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

示意图5 畸变CD4+T肝细胞对较太快成果的T肝细胞激活的正向更敏感。SP两组用红色的新线和圆圈回应，HD两组用粉红色的新线和圆圈回应，浅蓝色的新线/圆圈回应酪氨酸sp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T肝细胞展开分选。CD4+CD25−(；也者)被cfsel标示出，treg按判读的%指示剂。用抗CD3 /28微珠激活肝细胞，培训3天后展开流式肝细胞拳法(CD25反染)和肝正向分析法则。HD Treg与HD、SP或sp606；也者共同培训。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE正向百分所部(b)。(c,d) CD25正向百分所部(c)和CD134正向百分所部(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培训先前的传达。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析法则。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论断：我们得出的论断是，来自较太快成果子的激活知觉CD4+Treg在GITR传达先前得到了扩展和丰富多彩，阐释了进一步研究工作Treg在1改型乳癌有可能性群棒状先前的异质性的全面性。

出处出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28